荧光滤光片的选择

荧光滤光片的选择

如何选择合适的荧光滤光片是广大科研人员在项目过程中需要考虑的问题。

荧光滤波片选取的原则是在成像端尽可能让荧光/发射光透过，同时完全阻挡激发光，获得最高的信噪比。尤其是对于多光子激发和全内反射显微镜的应用，微弱的噪声也会对成像效果造成很大的干扰，因此对信噪比的要求更高。

通常我们看滤光片的参数一般会看透射率光谱，但往往荧光相对于激发光的强度很弱，选择滤光片更需要参考阻挡深度光谱图——OD值。OD值更能直观地反映滤光片对光的阻挡特性。

在选择激发滤光片和发射滤光片时，两者的阻挡深度光谱交点（OD交点）是重要的判断标准，一般要求宽场光源激发是交点OD值大于5，激光激发时大于OD6，以实现较好的荧光信噪比。

有时激发和发射滤光片（EX滤光片和EM滤光片）的透射光谱组合看起来很完美，但转换成OD值之后却发现光谱交点仅为OD1，不符合荧光成像的基本要求。因此，一般会建议激发和发射滤光片的透射光谱有一定的距离，比如10nm。